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Doctor Víctor Alfaro
PRACTICA 3 CÁMARA NEUBAUER
2LM
OBJETIVO
El objetivo de la siguiente practica más que nada es saber enfocar la cámara de Neubauer en el microscopio utilizando lo aprendido en la practica 2 de enfoque de microscopio, así como repasar el enfoque que realizamos pero hora con la cámara de Neubauer.
INTRODUCCIÓN
EL enfoque que realizamos en la práctica dos será de utilidad en esta práctica ya que con los conocimientos adquiridos de cómo enfocar podremos enfocar de manera adecuada la cámara de Neubauer que utilizaremos mas adelanta para hace un recuento de eritrocitos. Es por esto que las prácticas anteriores son de mucha utilidad en esta práctica porque gracias a ellas tenemos conocimientos de las partes que conforman al microscopio y los procedimientos para enfocar en distintos objetivos, mismo que utilizaremos en esta práctica.
MATERIALES
Microscopio
Cámara de Neubauer
Bata y guantes.
MARCO TEÓRICO
La Cámara de Neubauer es un instrumento utilizado en cultivo celular para realizar conteo de células en un medio de cultivo líquido. Consta de dos placas de vidrio, entre las cuales se puede alojar un volumen conocido de líquido. Una de las placas posee una grilla de dimensiones conocidas y que es visible al microscopio óptico. Para contar las células de un cultivo líquido, se agregar una gota de este entre estas dos placas y observar al microscopio óptico la cantidad de células presentes en un campo determinado de la grilla.
En base a la cantidad de células contadas, conociendo el volumen de líquido que admite el campo de la grilla, se calcula la concentración de células por unidad de volumen de la solución de medio de cultivo inicial.
ÍNDICE
*Objetivo
*Introducción
*Materiales
*Marco teórico
*Instrucciones
*Conclusión
*Anexos
*Referencias
INSTRUCCIONES
*Colocamos la cámara de Neubauer sobre la mesa y también el microscopio.
*Conectamos el microscopio y colocamos la cámara de Neubauer sobre la platina del microscopio.
*Posteriormente lo encendemos y hacemos el enfoque con los objetivos secos, subiendo o bajando la platina según sea el caso con el tornillo micrométrico y abriendo o cerrando el diafragma para el paso de luz necesaria para el enfoque.
*Cuando ya hallamos localizado los cuadritos de la cámara de Neubauer pasamos a dibujarlos. Como se ve en la imagen.
CUADRICULA DE LA CÁMARA DE NEUBAUER
*Después retiramos la cámara de Neubauer y la guardamos al igual que el microscopio.
CONCLUSIÓN
Con esta práctica logramos a enfocar la cámara de Neubauer con el procedimiento indicado en la práctica anterior y además pudimos extender un poco mas nuestro conocimiento utilizando ahora un material de uso común en el laboratorio.
ANEXOS
La Cámara de Neubauer es un instrumento utilizado en medicina y biología para realizar el recuento de células en un medio líquido, que puede ser un cultivo celular, sangre, orina, líquido cefalorraquídeo, líquido sinovial, etc. Esta cámara de contaje está adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos que tiene dos zonas ligeramente deprimidas y que en el fondo de las cuales se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula de dimensiones conocidas. Se cubre la cámara con un cubre cámaras que se adhiere por simple tensión superficial.
Luego se introduce el líquido a contar, al que generalmente se ha sometido a una dilución previa con un diluyente, por capilaridad entre la cámara y el cubre cámara; puesto que tiene dos zonas esto permite hacer dos recuentos simultáneamente. Para contar las células se observa el retículo al microscopio con el aumento adecuado y se cuentan las células. Con base en la cantidad de células contadas, conociendo el volumen de líquido que admite el campo del retículo, se calcula la concentración de células por unidad de volumen de la muestra líquida inicial. La fórmula de valoración del número de células (válida universalmente) es la siguiente: Partículas por μl= (partículas contadas)/ (superficie contada (mm²) ∙profundidad de la cámara (mm) ∙ dilución).
REFERENCIAS
suba trabjos que sean de ayuda eso no dice nada
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